ⅠNucleinsavibevezető
A nukleinsavat dezoxiribonukleinsavra (DNS) és ribonukleinsavra (RNS) osztják, amelyek közül az RNS riboszomális RNS-re (rRNS), hírvivő RNS-re (mRNS) és transzfer RNS-re (tRNS) oszlik különböző funkciói szerint.A DNS főként a sejtmagban, a mitokondriumokban és a kloroformban koncentrálódik, míg az RNS főként a citoplazmában oszlik el.A génexpresszió anyagi alapjaként a nukleinsav extrakció rendkívül fontos szerepet játszik a molekuláris biológiai kutatásokban és a klinikai molekuláris diagnosztikában.A nukleinsav-extrakció koncentrációja és tisztasága közvetlenül befolyásolja a következő PCR-t, szekvenálást, vektorkonstrukciót, enzimemésztést és egyéb kísérleteket.
Ⅱ Nukleinsav extrakciós és tisztítási módszer
① Fenol/kloroform extrakciós módszer
A fenol/kloroform extrakció egy klasszikus DNS-kivonási módszer, amely főként két különböző szerves oldószerrel kezeli a mintákat, a vizes fázisban DNS alapú nukleinsavat, a szerves fázisban lipideket, a két fázis között pedig fehérjéket old.Ennek a módszernek az előnyei az alacsony költség, a nagy tisztaság és a jó hatás.Hátránya a bonyolult működés és a hosszú idő.
② Trizol módszer
A Trizol módszer az RNS extrakció klasszikus módszere.A Trizol módszert kloroformos centrifugálás után vizes és szerves fázisra osztják, amelyben az RNS-t a vizes fázisban feloldják, a vizes fázist új EP-csőbe helyezik, izopropanol hozzáadása után csapadékot kapnak, majd etanolos tisztítást végeznek.Ez a módszer alkalmas RNS extrakcióra állati szövetekből, sejtekből és baktériumokból.
③ Centrifugális oszlopos tisztítási módszer
A centrifuga oszlopos tisztítási módszer a DNS-t specifikusan speciális szilíciummátrix adszorpciós anyagokon keresztül képes adszorbeálni, míg az RNS és a fehérje zökkenőmentesen áthaladhat, majd magas sótartalmú, alacsony pH-értéket használ a nukleinsavak, az alacsony sótartalmú magas PH értékű elúciók kombinálására a nukleinsav elválasztására és tisztítására.Az előnyök a magas tisztítási koncentráció, a nagy stabilitás, a szerves oldószer hiánya és az alacsony költség.Hátránya, hogy lépésről lépésre, több műveleti lépésben kell centrifugálni.
④ Mágneses gyöngyök módszere
A mágneses gyöngyök módszere szerint a sejtszövetmintát a lizátumon keresztül hasítják, felszabadítják a mintában lévő nukleinsavat, majd a nukleinsavmolekulák specifikusan adszorbeálódnak a mágnesgyöngy felületén, miközben a szennyeződések, például a fehérjék és a cukrok a gyöngyben maradnak. a folyadékot.A sejtszövet hasítása, mágneses gyöngyök nukleinsavval történő megkötése, nukleinsavmosás, nukleinsavelúció stb. lépései révén végül tiszta nukleinsavat kapunk.Az előnyök az egyszerű kezelés és a rövid ideig tartó használat, lépéses centrifugálás nélkül.Alacsony műszaki követelményekkel rendelkezik, és képes automatikus és tömeges működést megvalósítani.A mágnesgyöngy és a nukleinsav specifikus kombinációja nagy koncentrációjú és tisztaságú extrahált nukleinsavat eredményez.Hátránya, hogy a jelenlegi piaci ár viszonylag drága.
⑤ Egyéb módszerek
A fenti négy módszer mellett létezik forrásban lévő krakkolás, koncentrált só módszer, anionos detergens módszer, ultrahangos módszer és enzimes módszer stb.
Ⅲ A nukleinsav extrakció típusa
A Foregene rendelkezik a világ vezető közvetlen PCR platformjával, kétoszlopos RNS-izolációs platformmal (csak DNS + csak RNS).A fő termékek közé tartoznak a DNS/RNS izolációs készletek, a PCR és a Direct PCR reagensek molekuláris laboratóriumi reagenssorozatai.
① Teljes RNS extrakció
A teljes RNS extrakciós minták közé tartozik a vér, a sejtek, az állati szövetek, a növények, a vírusok stb. A teljes RNS extrakcióval nagy tisztaságú és nagy koncentrációjú össz-RNS nyerhető, amely felhasználható RT-PCR-ben, chipanalízisben, in vitro transzlációban, molekuláris klónozás, Dot Blot és más kísérletek.
Foregene kapcsolatosRNS izolációs készletek
Animal Total RNS Isolation Kit--Gyorsan és hatékonyan vonja ki a nagy tisztaságú és jó minőségű teljes RNS-t különböző állati szövetekből.
Cell Total RNS Isolation Kit--Különféle tenyésztett sejtekből 11 perc alatt nagy tisztaságú és jó minőségű össz-RNS nyerhető.
Plant Total RNS Isolation Kit--Alacsony poliszacharid- és polifenoltartalmú növényi mintákból gyorsan kivonja a kiváló minőségű teljes RNS-t.
Vírusos RNS izolációs készlet-- A vírus RNS gyors izolálása és tisztítása mintákból, például plazmából, szérumból, sejtmentes testnedvekből és sejttenyészet felülúszójából.
② Genomiális DNS-kivonás
A genomiális DNS-kivonási minták közé tartozik a talaj, az ürülék, a vér, a sejtek, az állati szövetek, a növények, a vírusok stb. A genomiális DNS-kivonás felhasználható enzimemésztésben, DNS-könyvtár-építésben, PCR-ben, antitest-előkészítésben, Western blot hibridizációs elemzésben, génchipben, magas -áteresztőképesség szekvenálás és egyéb kísérletek.
Foregene kapcsolatosDNS izolációs készletek
Animal Tissue DNS Isolation Kit-Genomi DNS gyors extrakciója és tisztítása többféle forrásból, például állati szövetekből, sejtekből stb.
Blood DNA Midi Kit (1-5 ml)-- Gyorsan megtisztítja a kiváló minőségű genomiális DNS-t az antikoagulált vérből (1-5 ml).
Bukkális tampon/FTA-kártya DNS-elválasztó készlet-- Gyorsan megtisztítja a kiváló minőségű genomikus DNS-t a bukkális tampon/FTA kártya mintákból.
Növényi DNS izolációs készlet-- Gyorsan megtisztíthatja és kiváló minőségű genomiális DNS-t nyerhet növényi mintákból (beleértve a poliszacharidokat és polifenol növényi mintákat is)
③ Plazmid extrakció
A plazmid egyfajta körkörös kis molekulájú DNS a sejtekben, amely a DNS-rekombináció általános hordozója.A plazmid extrakciójának módszere az RNS eltávolítása, a plazmid elválasztása a bakteriális genomiális DNS-től, valamint a fehérjék és egyéb szennyeződések eltávolítása, hogy viszonylag tiszta plazmidot kapjunk.
General Plasmid Mini Kit- Gyorsan megtisztítja a kiváló minőségű plazmid DNS-t a transzformált baktériumokból rutin molekuláris biológiai kísérletekhez, mint például a transzformáció és az enzimemésztés
④ Egyéb extrakciós típusok, miRNS extrakció stb.
Állati miRNS izolációs készlet- Gyorsan és hatékonyan kinyerhető 20-200 nt miRNS, siRNS, snRNS kis RNS fragmentumai különböző állati szövetekből és sejtekből
Ⅳ A nukleinsav extrakcióval és tisztítással kapcsolatos követelmények eredményes
① A nukleinsav elsődleges szerkezetének integritásának biztosítása.
② Csökkenti a fehérjék, cukrok, lipidek és más makromolekulák interferenciáját
③ A nukleinsavmintákban nem lehet szerves oldószer vagy nagy koncentrációjú fémionok, amelyek gátolhatják az enzim működését.
④ Az RNS és más nukleinsav szennyeződéseket ki kell küszöbölni a DNS kivonásakor, és fordítva.
Feladás időpontja: 2022. november 24
